一、外标法

　　外标法比较简单，通过比较已知浓度的峰面积和未知物的峰面积，从而计算出未知物的含量，如table 1的数据: 浓度点是 1, 2, 5, 10, 20, 50, 100, 200, 500, and 1000 ng/mL

　　做出的校准曲线 figure 1：

　　x轴是浓度点，y对应的是相应的相应值

　　当欲测组分含量变化不大，并已知这一组分的大概含量时，也可以不必绘制标准工作曲线，而用单点校正法，即直接比较法定量。单点校正法实际上是利用原点作为标准工作曲线上的另一个点。因此，当方法存在系统误差时(即标准工作曲线不通过原点)，单点校正法的误差较大。因此规定，y=ax+b b的绝对值应不大于100%响应值是y的2%。

　　标准曲线法的优点：绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了，计算时可直接从标准工作曲线上读出含量，这对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间，在此段时间内可经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正，以确定该标准工作曲线是否还可使用。

　　标准曲线法的缺点：每次样品分析的色谱条件(检测器的响应性能，柱温度，流动相流速及组成，进样量，柱效等)很难完全相同，因此容易出现较大误差。另外，标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组分的标准样品(或已知准确含量的样品)，因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进行补偿。

　　二、内标法

　　内标法就是向标样和样品中加入一样浓度的内标，用标样与内标的响应值的比率和样品与内标的响应值的比率相比较，从而计算出未知物的含量 ，同样根据table 1 的数据做出校准曲线 figure 2

　　x轴是浓度点，y轴是 标样与内标的响应值的比率，如果内标是在前处理前加入，那么考量的是整个前处理流程和进样系统的变化，如果内标是在前处理后加入，那么考量的是进样系统的变化

　　内标法的关键是选择合适的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质，该物质的性质应尽可能与欲测组分相近，不与被测样品起化学反应，同时要能完全溶于被测样品中。内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰，或位于几个欲测组分的峰中间，但必须与样品中的所有峰不重叠，即完全分开。

　　内标法的优点：进样量的变化，色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大，特别是在样品前处理(如浓缩、萃取，衍生化等)前加入内标物，然后再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失。若要获得很高精度的结果时，可以加入数种内标物，以提高定量分析的精度。

　　内标法的缺点：选择合适的内标物比较困难，内标物的称量要准确，操作较麻烦。使用内标法定量时要测量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积(或峰高)，根据误差叠加原理，内标法定量的误差中，由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2是由于进样量的变化和色谱条件变化引起的误差，内标法比标准曲线法要小很多，所以总的来说，内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好。

　　三、是外标法还是内标法?

　　如果前处理流程比较简单，进样也很准确，那么可以选择外标法，譬如前处理只是超声过滤一下，然后还是自动进样

　　如果前处理流程复杂，进样也不是很准确，譬如手动进样，那么可以选择内标法

　　如何选择呢?简单的做法就是同时用外标法和内标法去测试样品，比较测试误差，通过比较误差的大小来选择合适的校准方式

　　四、标样加入法

　　不论是外标法还是内标法，在配置标准曲线的时候，要用基质空白试剂(含有基质但不含有标准物质的空白试剂)去稀释定容标准曲线，这样能够很好的反映出基质对信号的抑制或者放大。

　　如果找不到基质空白的试剂呢?可以选择标样添加法，向含有未知含量的基质试剂中加入一定浓度的标样，如table 1的数据，用含有未知含量的基质试剂配置0, 1, 2, 5, 和 10 ng/m的曲线，如figure 3

　　会发现，x轴有明显的截距，截距的大小反映的就是基质中未知物的多少标准加入法的优点：不需要另外的标准物质作内标物，只需欲测组分的纯物质，进样量不必十分准确，操作简单。若在样品的前处理之前就加入已知准确量的欲测组分，则可以完全补偿欲测组分在前处理过程中的损失，是色谱分析中较常用的定量分析方法。标准加入法的缺点：要求加入欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同，以保证两次测定时的校正因子完全相等，否则将引起分析测定的误差。

　　五、结论

　　外标法比较简单，但适用于前处理流程比较简单，进样也很准确的方法;

　　内标法虽然可以很好的提高方法的准确度和精确度，但需要选择合适的内标，同时成本也会有所上升;如果找不到空白的基质试剂，可以选择标样添加法。

　　转自：实验室ISO17025

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