移液器是药学试验不可缺少的武器,用好移液器可缩短工作时间,提高试验准确度,重使实验起来时间短、误差小、重现性好。
而且移液器的价格也是真心贵,如果感觉试验重现性不好就买个新的,估计身为实验员的我们,这点工资也是不够老板扣的。最重要的一点,为了提高效率,避免试验重做,各位一定要盯住自家实验员的规范操作,想提高效率要明确告诉他哪里可以偷懒,哪里不可以!
放下那么多大题不写,让小编决定特意写一下移液器这么小的事,是因为发生了一件事~
小编有一次周末去一个单位访友,发现该单位除了这位悲催的朋友外,还有个年轻的妹子正在加班测含量。
妹子拿1000ul的枪进行“取0.1ml置10ml量瓶中,用溶剂稀释至刻度”的操作。
小编没忍住,就过去问妹子。
“美女你怎么不用移液管”。
妹子:“用移液枪比较快啊。”
“那你为什么用1000ul的枪?”
妹子:“因为在量程的10%范围内啊,而且100ul枪估计被人拿走了,没找到。”
因为不是自己的人小编就没多说什么,但是内心默默的决定了,回去要看看自己的实验员是不是也是这么操作的。
那么,如何正确使用移液器才能做到快准狠?切实的提高效率。今天我们就来八一八。
移液器工作原理
移液器是具有一定量程范围,可将液体从容器内吸出,移入另一容器内的计量工具。
移液器一般分为空气置换式和外置活塞式,其中常用型为空气置换式。
空气置换式移液器可以在标准的实验室温度和压力条件下准确分配水性溶液,但当样品接触活塞时,移液器可能会受损或污染。
外置活塞式移液器可以用来转移非水性的特殊液体,如挥发性或粘性溶液。
准确性和重复性对于分析实验就是灵魂。所以每一步的误差一定要争取做到越低越好。
溶液稀释作为一个试验的起始步骤,对于试验的准确性和重复性的影响是不可忽视的。
如果选择使用移液器则一定要按照正确的方法来使用。
通常的量程一般在10%-100%量程范围内可以操作。
但是量的越少肯定误差越大。
所以最佳的量程选择35%-100%量程范围内进行操作。
如最大量程1000ul的移液器,最佳的量程是350ul-1000ul。
小编看见的那个妹子,理论上讲是沾上边了,但是为了试验的准确度着想。不建议大家这么做。
设定量程遵循由大到小的原则,可以提高0.5%的移液准确性。
举例:如果需要用最大量程1000ul的移液器分别移取400ul和600ul的液体,标准操作是先将移液器调节至大于600ul(如可以调节至620ul)的刻度,再调至600ul,而不是单纯的直接由400ul调至600ul。
吸头安装不好会带来移液误差,甚至移液失败。
应将移液器垂直对准吸头的开口处,使移液器和吸头口牢牢固定在一起,保证没有空隙,否则试剂会漏出。
正确操作方式如下:
单道移液器:移液器套柄用力下压并小幅度旋转即可。
多道移液器:将第一通道与最后一个通道的吸嘴与吸头对齐后,垂直向下装卸吸头内,并左右小幅度摇摆。
严禁用力敲击吸头,因套柄在强力摩擦下磨损影响密封性,并且吸头变形也会影响准确性。
浸入角度:垂直浸入液面,倾斜角度不能超过20°。
浸入深度:
0.1-10ul:1-2mm
10-200ul:2-3mm
200-2000ul:3-6mm
2000ul以上:6-10mm
不正确的吸液速度可能会导致至少5%的准确性下降。
应保持平顺,控制好吸液速度。
过快的吸液速度可能会造成:
样品溶液形成漩涡,产生气泡;
样品液进入套柄,对活塞和密封圈造成损伤;
带入气雾造成样品交叉污染。
小编提示:在使用移液器时观察下密封圈是否存在污染(存在气味或是变色),如果密封圈变色可以用甲醇浸泡超声,或是更换新的密封圈。
保证足够的吸头浸入时间能保证吸液充分。对吸取大量程样品或者高粘度样品尤其重要。
吸液后保持吸头浸入液面最少1秒钟,尤其是大量程的移液器;
然后将吸头平缓移开液面。
润洗吸头可以在吸头内形成同质膜,降低吸头对样品的吸附,并且有助于提高吸头多次相同移液操作的一致性。
用同一样品润洗2-3次(按压/释放活塞2-3次)是比较合适的。
但对于高温或是低温样品,不适宜润洗。
在吸取挥发性高的试剂时,大家可能有这样的经验,吸液完成后,在转移过程中,吸头中的液体已经漏出一大半了,那是因为蒸汽进入吸头,内压增高,结果在排出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法为反复抽吸4-5次就可改善。
在这小编说下气相实验过程中的小技巧:在用气相色谱检测溶剂残留时,需要配置对照品溶液,那么也就涉及到精密称定。可以根据所测残留溶剂的限度计算称样量,根据密度,折算出量取体积,取量瓶至天平上,归零后,直接用移液器量取所需体积,排入量瓶中,所得质量和计算称样量及其相近。极大提高实验效率并较少称量误差。
排液:下压活塞按钮至第一停止点。
吹液:继续下压活塞按钮,到达第二停止点或通过第二停止点直至底部。
排液方法有三种:
1.沿内壁排液(常用)
2.在液面上方排液
3.直接排入液面下
小提示:直接排入液面下时要保持活塞一直下压再离开液面,否则容易导致倒吸。
手温的影响:为了避免手温影响,及时将使用完毕的移液器挂起。
样品温度的影响:提前将样品溶液从冰箱拿出,一定要放置至室温在进行移液操作。这点绝大多数的实验员都是做不到的,所以要特别注意。
按下移液器套柄前端侧边的白色按钮,吸头会自动脱落,将用过的废弃吸头回收后经超声波清洗后可以再利用,有钱任性的单位请直接忽略这一点。
移液器一般需3-6个月校正一次,需要交给厂家或是代理商进行。
但为了保证实验的万无一失,平时可以每月自行简单校正。校正方法为用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正移液器,如1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。
1.如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物。
2.移液器使用完毕后,把移液器量程调至最大值,这样可以减小对移液枪内弹簧的损伤及延长移液器的使用寿命。旋转调量程的旋钮时要注意不要扭过头,这样也会对弹簧造成伤害。
3.避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准。
4.当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞。
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