药品颜色的来源可能是活性成分本身的颜色,可能是由生产工艺中杂质引入,也可能是由于药品不稳定在贮存过程中降解产生。
溶液颜色检查法是原料药、溶液剂、注射剂等药品的常规检查项目。
关于溶液颜色检查法,各国药典均有收载,但具体方法还是有很大差异的,在此提醒大家,各家药典中溶液颜色的标准可不能随意套用哦。
今天小编总结了一下中国药典、美国药典、欧洲药典中溶液颜色检查法的差异,并列出相关法规依据,方便大家参考引用。
综述
中国药典的溶液颜色检查法有三个方法,美国药典有两个方法,欧洲药典只有目视比色法,分别在下表列出。
相信大家对紫外分光光度法测定吸光度的方法都比较了解,而色差计法应用较少,所以本文重点比较三家药典中的目视比色法。
目视比色法的差异
各药典的比较内容列于下表,可以看出,中国药典的比色液是与美国药典、欧洲药典不同的,美国药典与欧洲药典配制溶液的种类虽然相同,但是配制过程还是有差异的。
而且,三家药典在色调和色号上也都有很大不同。中国药典的色号越大,颜色越深;欧洲药典的色号越大,颜色越浅;美国药典各色号则不按照深浅,没有规律。
大家在参考药典质量标准,以及申报不同国家药品注册时,一定要仔细确认、认真研读。
比色液配制
比色液的配制是这部分的重点,但是三家药典中所用的试剂、稀释液、配制方法均有不同,中国药典和欧洲药典的具体配制过程均列于上述依据中,但美国药典比色液的配制则需要结合《Reagents, Indicators and Solution》的colorimetric solutions(CS)部分。各药典的具体配制过程见下文。
1 中国药典的比色液
请参考通则0901,此处不赘述。
2 美国药典的比色液
混合溶剂:盐酸-水(25:975)。
氯化钴比色液:称取氯化钴(CoCl2·6H2O)约65g,溶解于1000ml混合溶剂中,量取该溶液5ml置于250ml碘瓶中,加入过氧化氢试液5ml和氢氧化钠溶液(1→5)15ml,煮沸10min,放冷,加入碘化钾2g和稀硫酸(1→4)20ml。溶解后,用0.1N硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘,加入淀粉试液3ml作为指示剂,并将滴定结果用空白实验校正。每1ml 0.1N硫代硫酸钠滴定液相当于23.79mg的CoCl2·6H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积,使每1ml比色液中含59.5mg的CoCl2·6H2O。
硫酸铜比色液:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)约65g,溶解于1000ml混合溶剂中,量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中,加入水40ml、醋酸4ml、碘化钾3g和盐酸5ml。用0.1N硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘,并加入淀粉试液3ml作为指示剂,并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1N硫代硫酸钠滴定液相当于24.97mg的CuSO4·5H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积,使每1ml比色液中含62.4mg的CuSO4·5H2O。
三氯化铁比色液:称取三氯化铁(FeCl3·6H2O)约55g,溶解于1000ml混合溶剂中,量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中,加入水15ml、碘化钾3g和盐酸5ml,混匀,放置15min,加入水100ml,用0.1N硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘,加入淀粉试液3ml作为指示剂,并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1N硫代硫酸钠滴定液相当于27.03mg的FeCl3·6H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积,使每1ml比色液中含45.0mg的FeCl3·6H2O。
3 欧洲药典的比色液
混合溶剂:盐酸-水(25:975)。
三氯化铁比色液:称取三氯化铁(FeCl3·6H2O)约46g,溶解于900ml混合溶液中,并用混合溶剂稀释至1000ml,量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中,加入水15ml、碘化钾4g和盐酸5ml,混匀,暗处放置15min,加入水100ml,用0.1M硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘,在近终点时加入淀粉试液0.5ml作为指示剂,并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1M硫代硫酸钠滴定液相当于27.03mg的FeCl3·6H2O。用盐酸和水的混合溶液调整本比色液的体积,使每1ml比色液中含45.0mg的FeCl3·6H2O。
氯化钴比色液:称取氯化钴(CoCl2·6H2O)约60g,溶解于900ml混合溶液中,并用混合溶剂稀释至1000ml,量取该溶液5ml置于250ml碘瓶中,加入稀过氧化氢溶液5ml和300g/L氢氧化钠溶液10ml,煮沸10min,放冷,加入碘化钾2g和稀硫酸60ml。溶解后,用0.1M硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘,在近终点时加入淀粉试液0.5ml作为指示剂,并将滴定结果用空白实验校正。每1ml0.1M硫代硫酸钠滴定液相当于23.79mg的CoCl2·6H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积,使每1ml比色液中含59.5mg的CoCl2·6H2O。
硫酸铜比色液:称取硫酸铜(CuSO4·5H2O)约63g,溶解于900ml混合溶液中,并用混合溶剂稀释至1000ml,量取该溶液10ml置于250ml碘瓶中,加入水50ml、稀醋酸溶液12ml、碘化钾3g。用0.1M硫代硫酸钠滴定液滴定游离碘,在近终点时加入淀粉试液0.5ml作为指示剂,并将滴定结果用空白实验校正。每1ml 0.1M硫代硫酸钠滴定液相当于24.97mg的CuSO4·5H2O。用混合溶剂调整本比色液的体积,使每1ml比色液中含62.4mg的CuSO4·5H2O。
总结
想必大家已经看出,三家药典的差异性还是很大的,所以在查阅各国药品质量标准时,绝对不能随意套用溶液颜色的限度标准。
检查过程中,还要注意以下几点:
1、 所用比色管应洁净、干燥,洗涤时不能用硬物磨刷,应用铬酸洗液浸泡后用纯化水冲净,避免表面粗糙或粘有杂物。
2、参考各国标准时,需要注意比色液、色调、色号的选择,以及检查时视线的方向。
3、检查时光线应明亮,光强度应能保证使各相邻色号的标准液清晰分辨。
4、争议结果的处理:中美药典都推荐以色差计法的检测结果为准,实验单位配备色差计也是一个发展方向呢。
现在是不是能够拿捏到各国药典的不同之处,从而灵活运用了呢?
若有不当之处,敬请指正。大家还对两国药典哪个部分的异同感兴趣,欢迎留言,跟着小编,一起学药典。
参考文献
1、中国药品检验标准操作规范(2019年版)
2、中国药典(2020年版)
3、美国药典(43版)
4、欧洲药典(10.0版)
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